Методы определения содержания гемоглобина
Материал подготовлен резидентом КазНМУ им. С.Д. Асфендиярова Енцовым Д.В.
В прошлом большое распространение получил простой метод колориметрического определения одного из производных гемоглобина - солянокислого гематина, образующегося при добавлении к крови соляной кислоты (метод Сали). Однако этот метод оказался весьма неточным. Ошибка при определении содержания гемоглобина этим методом может достигать ± 30%, в связи с чем в настоящее время он не рекомендуется для характеристики гемоглобина.
Основным методом определения концентрации гемоглобина является унифицированный цианметгемоглобиновый метод. Его принцип сводится к следующему: железосинеродистым калием (красной кровяной солью) гемоглобин окисляют в метгемоглобин, который с ацетонциангидрином образует окрашенный цианметгемоглобин. Через 20 минут концентрацию последнего определяют на фотоэлектроколориметре (ФЭК).
Материалом исследования служит смесь 5,0 мл трансформирующего раствора, содержащего указанные реактивы (железосинеродистый калий и ацетонангидрид), с 0,02 мл крови. Интенсивность окраски измеряют на ФЭКе и затем рассчитывают концентрацию гемоглобина по калибровочному графику. Метод позволяет суммарно определить все разновидности гемоглобина, за исключением сульфгемоглобина.
Цианметгемоглобиновый метод лежит в основе определения концентрации гемоглобина в большинстве современных автоанализаторов.
Интерпретация результатов
