Утверждена
приказом Председателя
Комитета контроля медицинской и
фармацевтической деятельности МЗ и СР РК
от 24 октября 2016 года № 004529
Инструкция
по медицинскому применению изделия медицинского назначения
Название изделия медицинского назначения
Набор реагентов для определения нейрон-специфической енолазы NSE (CanAg NSE EIA)
Состав и описание изделия
Введение и объяснение метода
Гликолитическая ферментная енолаза (2-фосфо-D-глицерато гидро-лиаза, EC 4.2.1.11) существует в виде нескольких димерных изоферментов (aa, ab, ag, bb и gg) образованных из трех субъединиц a, b и g. g-единица обнаружена или в гомологических gg- или в гетерологических ag-изоферментах и известна как нейрон-специфическая енолаза (НСЕ). Моноклональные антитела, используемые в данном наборе, связаны с g-субъединицей фермента и, следовательно, детектируют и gg и ag формы.
Уровни НСЕ низкие у здоровых людей и пациентов с доброкачественными заболеваниями. Повышенные уровни обычно обнаруживаются у пациентов с нейроэндокринными опухолями, особенно с мелкоклеточным раком легких и нейробластомой.
Количественное определение НСЕ в сыворотке важно для пациентов с подозрением на мелкоклеточный рак легких или нейробластому для дифференциальной диагностики, мониторинга эффективности лечения и обнаружения рецидивов болезни.
Принцип метода
Настоящий набор является твердофазным, неконкурентным методом, основанным на изпользовании двух типов моноклональных мышиных антител, направленных против двух различных антигенных детерминант в молекуле НСЕ. Используемые моноклональные антитела связываются с g-субъединицей фермента и следовательно, детектируют и gg и ag формы. Стандарты и сыворотки пациентов инкубируются вместе с биотинилированными анти-НСЕ антителами MAb Е21 и моноклональными антителами Е17, конъюгированными с пероксидазой хрена (HRP) в покрытых стрептавидином лунках микропланшета. После промывки в каждую лунку добавляется буферный субстрат/хромогенный реагент (перекись водорода и 3,3',5,5'-тетраметилбензидин), в результате происходит ферментативная реакция. В процессе реакции развивается голубая окраска, если присутствует антиген. Интенсивность окраски пропорциональна количеству НСЕ, присутствующей в образце.
Интенсивность окраски измеряется на микропланшетном ридере при 620 нм (или опционально, при 405 нм после добавления стоп-раствора).
Стандартные кривые строятся для каждого анализа в координатах оптическая плотность против концентрации для каждого стандарта. Концентрация НСЕ в образцах пациента рассчитывается по калибровочной кривой.
Компоненты набора
· Каждый набор содержит реагенты для 96 тестов.
· Срок годности набора указан на упаковке.
· Не используйте набор после истечения срока годности.
· Не смешивайте реагенты из различных лотов.
