Утверждена
приказом Председателя
Комитета контроля медицинской и
фармацевтической деятельности МЗ и СР РК
от 1 июня 2017 года № 008557
Инструкция
по медицинскому применению изделия медицинского назначения
Название изделия медицинского назначения
Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК Ureaplasmaurealyticum и ДНК Ureaplasmaparvumметодом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Ureaplasmaurealyticum / Ureaplasmaparvum) (комплект 1)
Состав и описание изделия
1. Характеристика набора
Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию гибридизационного ДНК-зонда, специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя инфекции, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5′-конце флуоресцентный краситель, а на 3′-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5′−3′-нуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5′-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО).
2. Состав набора
Комплектность:
1. Положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum - 1 фл., 1 мл.;
2. Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок (12 стрипов по 8 пробирок).
3. Стрипированные крышки для пробирок (12 стрипов по 8 штук) или оптическая плёнка - 1,5 листа.
3. Аналитические и диагностические характеристики
3.1. Чувствительность - определение 100 копий ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum в стандартных образцах предприятия - 100%.
3.2. Специфичность определения ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum(по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%.
4. Оборудование и материалы
