Утверждена
приказом Председателя Комитета
контроля медицинской и фармацевтической деятельности
Министерства здравоохранения Республики Казахстан
от 11 декабря 2012 года № 987
Инструкция
по применению изделия медицинского назначения для потребителя
(аннотация-вкладыш)
Название изделия медицинского назначения. Набор реагентов для выявления ДНК трихомонаса вагиналис (Trichomonas vaginalis) методом полимеразной цепной реакции (ТРИХО-ГЕН) в следующих формах комплектации
Состав и описание изделия
Набор реагентов ТРИХО-ГЕНоснован на использовании амплификации ДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурной денатурации ДНК, отжига праймеров (затравок) с комплементарными последовательностями и последующей достройке полинуклеотидных цепей ДНК-полимеразой.
В наборе ТРИХО-ГЕН в смесь для амплификации добавлен внутренний контрольный образец (ВК), предназначенный для оценки эффективности протекания полимеразной цепной реакции. В наборах в формате «Flash» и «Real-time» в смесь для амплификации введены ДНК-зонды, каждый из которых содержит флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. В случае образования специфичного продукта ДНК-зонд разрушается, что ведет к возрастанию уровня флуоресценции, который фиксируется специальными приборами. ДНК-зонды, использующиеся для детекции продуктов амплификации искомого фрагмента генома трихомонаса вагиналис и внутреннего контрольного образца (ВК), мечены флуоресцентными метками FAM и HEX соответственно, что позволяет раздельно регистрировать результаты амплификации фрагмента генома трихомонаса вагиналис и внутреннего контрольного образца. Для анализа продуктов ПЦР можно использовать детектирующие амплификаторы, специализированные детекторы флуоресценции (ПЦР-детекторы) или метод электрофореза в агарозном геле. Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено применение «горячего» старта, который обеспечивается методикой приготовления реакционной смеси, состоящей из двух слоев, разделенных прослойкой из парафина. Смешение слоев и превращение их в амплификационную смесь происходит только при плавлении парафина, что исключает неспецифический отжиг праймеров на ДНК-мишени при начальном прогреве пробирки.
Набор состоит из четырех комплектов:
а) комплект реагентов для выделения ДНК (Проба-ГС), включает:
·лизирующий раствор, 15 мл 1 флакон;
·сорбент, по 1,0 мл 2 пробирки;
·промывочный раствор № 1, 20 мл 1 флакон;
·промывочный раствор № 2, 20 мл 1 флакон;
·промывочный раствор № 3, 20 мл 1 флакон;
·элюирующий раствор, 10 мл 1 флакон.
Комплект является универсальным для всех форматов.
б) комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-РАПИД), включает:
- реактив «Проба-Рапид», по 500 мкл 100 пробирок.
Комплект является универсальным для всех форматов.
в) комплект реагентов для ПЦР-амплификации ДНК трихомонаса вагиналис:
·смесь для амплификации, запечатанную парафином, по 20 мкл 100 пробирок;
·раствор Taq-полимеразы, по 500 мкл 2 пробирки;
·ПЦР-буфер, 200 мкл 1 пробирка;
