Утвержден
приказом Председателя
Комитета контроля медицинской и
фармацевтической деятельности МЗ РК
от 14 декабря 2010 года № 686
Инструкция
по применению изделия медицинского назначения для потребителя
(аннотация-вкладыш)
Название изделия медицинского назначения
Набор реагентов «РеалБест ДельтаМаг ВГВ/ВГС/ВИЧ» (комплект 1, вариант 1-16) для одновременного выделения ДНК ВГВ, РНК ВГС и РНК ВИЧ из сыворотки (плазмы) крови для последующего анализа методом ПЦР с детекцией в реальном времени
Состав и описание изделия
Принцип метода
Целью этапа пробоподготовки является концентрирование молекул вирусной РНК или ДНК и удаление компонентов сыворотки, способных выступать в качестве ингибиторов процессов обратной транскрипции и ПЦР. Принцип работы набора заключается в связывании целевой НК с магнитным сорбентом, которое обусловлено специфичной к последовательности НК гибридизацией. На этапе лизиса происходит разрушение комплексов белков с нуклеиновыми кислотами за счёт детергентов и разобщающих агентов, входящих в состав лизирующего раствора, после чего целевая НК гибридизуется с находящимися в лизирующем растворе медиаторными олигонуклеотидами. На следующем этапе происходит сорбция комплекса медиаторного олигонуклеотида с целевой НК на магнитные частицы за счёт взаимодействий гомополимерного тракта, входящего в состав олигонуклеотида, и комплементарной ему гомополимерной ДНК, ковалентно связанной с поверхностью частиц. Магнитные частицы с сорбированными молекулами целевой НК собираются магнитом, надосадочная жидкость удаляется, и осадок магнитных частиц подвергается серии промывок водными растворами для удаления ингибиторов ПЦР и нецелевой НК. Ресуспендирование осадка в элюирующем растворе и последующий нагрев приводят к разрушению комплекса медиаторного олигонуклеотида с целевой НК и переходу последней в раствор. Элюат, содержащий выделенную НК, переносится в готовую реакционную смесь для ПЦР или ОТ-ПЦР, входящую в состав наборов «РеалБест ВГВ ПЦР», «РеалБест ВГС ПЦР» или «РеалБест ВИЧ ПЦР».
Эффективность пробоподготовки образца оценивается с помощью внутреннего контроля (ВКО), вносимого в каждую пробирку вместе с активным сорбентом и проходящего все стадии пробоподготовки и следующего за ней ПЦР или ОТ-ПЦР анализа вместе с выделяемой НК.
Эффективность работы систем пробоподготовки и амплификации подтверждается с помощью слабого положительного контрольного образца (СПКО), входящего в состав наборов «РеалБест ВГВ ПЦР», «РеалБест ВГС ПЦР» и «РеалБест ВИЧ ПЦР».
Отсутствие контаминации проверяется с помощью отрицательного контрольного образца (ОКО).
СПКО и ОКО присутствуют в каждой постановке и проходят через все этапы пробоподготовки и ПЦР- анализа.
СОСТАВ НАБОРА
активный сорбент (АС16) - 3 пробирки;
раствор для восстановления активного сорбента (РВАС) - 3 флакона по 2 мл;
лизирующий раствор - 3 флакона по 50 мл;
промывочный раствор № 1 - 3 флакона по 50 мл;
промывочный раствор № 2 - 3 флакона по 20 мл;
элюирующий раствор - 3 флакона по 5 мл;
