Утверждена
приказом Председателя
Комитета контроля качества
и безопасности товаров и услуг МЗ РК
от 4 мая 2020 года № 028638
Инструкция
по медицинскому применению изделия медицинского назначения
1. Наименование медицинского изделия для диагностики in vitro:
Набор реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени (РеалБест РНК SARS-CoV-2)
2. Состав и описание медицинского изделия:
2.1. Состав:
| Компонент набора (сокращение) Описание. | Количество |
| Положительный контрольный образец (ПКО) Бесцветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%) | 1 пробирка, 1 мл |
| Готовая реакционная смесь для ОТ-ПЦР (ГРС) Лиофилизированная | 96 пробирок |
| Оптическая плёнка | 1,5 листа |
2.2. Принцип метода:
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного специфического фрагмента кДНК (полученной методом обратной транскрипции из РНК коронавируса SARS-CoV-2), заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров на комплементарные последовательности, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение уровня флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение уровня флуоресценции происходит благодаря использованию специфичного для данной кДНК гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции связывается с одной из цепей кДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5’-конце флуоресцентный краситель, а на 3’-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи зонд расщепляется с 5’-конца, благодаря 5’-3’-нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию уровня флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания уровня флуоресценции определяется исходным количеством РНК SARS-CoV-2 в образце.
Учёт эффективности выделения РНК из образцов обеспечивается выделением РНК коронавируса SARS-CoV-2 из клинического материала совместно с внутренним контрольным образцом (ВКО).
2.3. Аналитические и диагностические характеристики:
2.3.1. Чувствительность выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2, определяемая по стандартному образцу предприятия (СОП 05-2-860), составляет 25 копий в ПЦР-пробе (что соответствует 1×103 копий/мл исходного образца при использовании для выделения РНК наборов «РеалБест экстракция 100» или «РеалБест УниМаг»).
2.3.2. Диагностическая чувствительность выявления РНК коронавируса человека SARS-CoV-2: клинические испытания, проведённые на 100 положительных образцах, показали 100% чувствительность (интервал 97%-100%, с доверительной вероятностью 95%).
