СТ РК ИСО 30024-2011
Корма для животных
Определение активности фитазы
(ISO 30024:2009, IDT)
Содержание
Приложение А (информационное). Результаты межлабораторного испытания
Настоящий стандарт устанавливает определение активности фитазы в образцах кормов.
Метод не проводит отличий между фитазой, добавленной в качестве кормовой добавки, и эндогенной фитазой, уже присутствующей в кормовых материалах.
Метод не может применяться для оценки или сравнения эффективности фитазы в естественных условиях (in vivo). Метод не является прогнозным методом эффективности in vivo фитазы, присутствующей на рынке, поскольку можно разработать различную эффективность in vivo на единицу активности.
Метод подходит и подтвержден исключительно для определения активности фитазы и исключительно в полноценных кормах.
ПРИМЕЧАНИЕ. Гармонизированный метод был разработан на базе существующих в настоящий момент продуктов фитазы (E1600 (EC 3.1.3.8,3-фитаза), Е1614 (ЕС 3.1.3.26, 4-фитаза), и Е1640 (ЕС 3.1.3.26, 4-фитаза)). Следовательно, он не обязательно может подходить как таковой к продуктам фитазы, которые будут разрабатываться в будущем. Гармонизированный метод, таким образом, служит средством, пригодным лишь для оценки деятельности общей фитазы в кормовых образцах.
В настоящем стандарте применяется следующий термин с соответствующим определением:
Единица фитазы, U (phytase unit, U): количество энзима, высвобождающего 1 мкмоль неорганического фосфата из фитата в минуту при реакции, установленной настоящим стандартом.
Фитаза высвобождает фосфат из субстратного мио-инозита гексакисфосфата (фитата). Высвобожденный неорганический фосфат определяется путем образования желтого окрашивания с кислотным реактивом молибдата/ванадата. Оптическая плотность (OП) желтого окрашивания группы измеряется при длине волны 415 нм, а высвобожденный неорганический фосфат подсчитывается по фосфатной стандартной градуировочной кривой.
Используют только реактивы квалификации «химически чистый», а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду с эквивалентной чистотой.
ПРИМЕЧАНИЕ. Этот метод требует работы с опасными веществами. Соблюдайте локальные регламенты для потенциально опасных химикатов, чтобы свести к минимуму риски организационной, технической и личной безопасности.
4.1 Раствор аммиака, 25% (массовые); NH3.
4.2 Тетрагидрат гептамолибдата аммония, (1МН4)6Мо7О24·4Н2О.
4.3 Монованадат аммония, NH4VO3.
4.4 Соляная кислота, 25% (массовые); HCl.