Утвержден
приказом Председателя
Комитета контроля медицинской и
фармацевтической деятельности МЗ и СР РК
от 4 февраля 2015 года № 86
Инструкция
по применению изделия медицинского назначения для потребителя
(аннотация-вкладыш)
Название изделия медицинского назначения:
Набор реагентов для выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека методом ПЦР (HPV КВАНТ)
НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов HPV КВАНТ предназначен для выявления вируса папилломы человека (HPV 6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) в биологическом материале человека (соскоб из уретры, цервикального канала, заднего свода влагалища), типирования и количественного определения вируса папилломы человека методом полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени.
1.2 Набор может быть использован в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений и научно-исследовательской практике.
2.ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Принцип метода основан на использовании процесса амплификации ДНК, заключающемся в повторяющихся циклах: температурной денатурации ДНК, отжига праймеров с комплементарными последовательностями и последующей достройкой полинуклеотидных цепей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В наборе реагентов HPV КВАНТ в некоторые из пробирок со смесью для амплификации добавлен внутренний контрольный образец (ВК), предназначенный для оценки эффективности протекания полимеразной цепной реакции. В реакционную смесь для проведения ПЦР введены ДНК-зонды, каждый из которых несёт флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. При образовании специфичного продукта ДНК-зонд разрушается, действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, что ведёт к возрастанию уровня флуоресценции. Количество разрушенных зондов (а, следовательно, и уровень флуоресценции) пропорционально количеству образовавшихся специфических ампликонов и измеряется на каждом цикле амплификации.
Использование нескольких флуоресцентных красителей (каналы детекции FAM, HEX, Cy5) позволяет сократить количество пробирок, так как позволяет одновременно регистрировать результаты разных реакций амплификации, одновременно проходящих в одной пробирке. Для проведения ПЦР используют детектирующий амплификатор ДТ-96. После прохождения амплификации, по показателю индикаторного цикла программно рассчитывается количество микроорганизмов. Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено применение «горячего» старта, который обеспечивается методикой приготовления реакционной смеси, состоящей из двух слоев, разделенных прослойкой из парафина. Смешение слоев и превращение их в реакционную смесь происходит только при плавлении парафина, что исключает неспецифический отжиг праймеров на ДНК-мишени при начальном прогреве пробирки.
Таблица 1. Формы комплектации набора реагентов HPV КВАНТ,
маркировка и состав стрипов со смесью для амплификации.
HPV квант-21 |