Приложение 18
Утверждено приказом Министерства здравоохранения Кыргызской Республики от 22 сентября 2015 года № 544 |
Инструкция
по изготовлению консервированных стандартных эритроцитов и их применению в изосерологических исследованиях
Стандартные эритроциты, содержащие определенные сочетания аллоантигенов, предназначены для выявления антиэритроцитарных антител в сыворотке исследуемой крови, при определении групп крови АВО перекрестным способом, при определении резус-принадлежности крови, а также для проведения контроля специфичности и активности стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВО, сывороток антирезус, тест-сывороток и реактивов, предназначенных для определения антигенов различных систем эритроцитов крови человека. Стандартные эритроциты группы O должны содержать в эритроцитах клинически значимые антигены: D, С, C_w, с, Е, е, K, k, Fy, Jk, M, N, S, s, Le.
С целью увеличения срока годности стандартных эритроцитов можно производить их консервирование специально изготовленными консервирующими растворами.
I. Требования, предъявляемые к стандартным эритроцитам
Стандартные эритроциты для исследований по системе АВО должны давать четкую, хорошо видимую агглютинацию при взаимодействии со стандартными сыворотками соответствующей специфичности и не давать агглютинации с сыворотками, не содержащими антител против данного антигена эритроцитов.
Стандартные эритроциты группы А, предназначенные для выявления агглютинина анти-А, должны иметь титр не ниже 1:64, эритроциты группы В(III), предназначенные для выявления агглютинина анти-В, также должны иметь титр не ниже 1:64.
Титр антигенов А и В устанавливается с помощью цоликлонов анти-А, анти-В.
Время наступления агглютинации эритроцитов А(1) и В должно составлять не более десяти секунд; эритроцитов подгруппы А(3), В(2) - не более двух минут.
Стандартные эритроциты группы крови O не должны давать агглютинации с цоликлоном анти-А, анти-В и анти-АВ в течение двадцати минут.
Стандартные резус-положительные эритроциты группы крови O, содержащие антиген D, а также антигены C, C_w, с и Е, в различных сочетаниях, предназначенные для выявления антител системы резус, должны давать соответственно со стандартными сыворотками анти-D, анти-С, анти-С_w, анти-с, анти-Е и анти-е четкую агглютинацию при определении методом конглютинации с желатином, экспресс-методом в пробирках или на плоскости без подогрева или непрямой пробе Кумбса в зависимости от того, для какого метода исследования предназначена данная стандартная сыворотка антирезус.
Стандартные резус-отрицательные эритроциты O фенотипа ccddee не должны давать агглютинации с цоликлонами анти-D супер, анти-С, анти-Е содержащими соответствующие антитела.
Время наблюдения за отрицательной реакцией должно соответствовать времени, установленному для каждой из этих реакций.
II. Приготовление консервированных стандартных эритроцитов