СТ РК ИСО 13904-2011
Корма для животных
Определение содержания триптофана
(ISO 13904:2005, IDT)
Действие отменено с 1 января 2019 года в соответствии с приказом Министра по инвестициям и развитию Республики Казахстан от 20 декабря 2017 года № 376-од
Содержание
1. Область применения
2. Принцип
3. Реактивы и материалы
4. Оборудование
5. Процедура
6. Выражение результатов
7. Точность
8. Отчет об испытании
Приложение А (информационное). Результаты межлабораторного испытания
Приложение В (информационное). Наблюдения за методом
Библиография
1. Область применения
Настоящий стандарт описывает определение содержания общего и свободного триптофана в кормах (например, полноценные и дополнительные корма, кормовые добавки, сырье, ингредиенты, премиксы (предварительно приготовленные смеси) и концентраты). Стандарт не проводит отличий между D- и L-формами.
2. Принцип
Для определения общего триптофана образец гидролизуют в щелочной среде насыщенным раствором гидроксида бария и нагревают до 110°С в течение 20 часов. После гидролиза добавляется внутренний стандарт.
Для определения свободного триптофана образец экстрагируют в мягких кислотных условиях в присутствии внутреннего стандарта.
Триптофан и внутренний стандарт в гидролизате или в экстракте определяются обращено-фазной высокоэффективной жидкостной хромотографией С18 ВЭЖХ методом флюоресцентного обнаружения.
3. Реактивы и материалы
Используют только реактивы квалификации «химически чистый», а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду с эквивалентной чистотой.
3.1 Дважды дистиллированная вода, либо вода эквивалентной чистоты (удельная электропроводность не менее 10 мкСим/см).
3.2 Реперное вещество: триптофан (чистота/содержание не менее 99%) высушенный под вакуумом с помощью пятиоксида фосфора.
3.3 Внутреннее реперное вещество: α-метилтриптофан (чистота/содержание не менее 99%) высушенный под вакуумом с помощью пятиоксида фосфора.
3.4 Октагидрат гидрооксида бария.
Следует проявлять осторожность, чтобы не подвергать чрезмерно Ва(ОН)2 · 8Н2О влиянию воздуха, тем самым избегая образования ВаСО3, который мог бы исказить определение (см. наблюдения в В.3).
3.5 Гидрооксид натрия.
3.6 Ортофосфорная кислота, w = 85%.
3.7 Концентрированная соляная кислота, ρ20 = 1,19 г/см3.
3.8 Метиловый спирт, квалификации «для ВЭЖХ».
3.9 Петролейный эфир, интервал выкипания от 40°С до 60°С.
3.10 Раствор гидрооксида натрия, с = 1 моль/л.
Растворяют 40,0 г NaOH (см. 3.5) в воде (см. 3.1) и доводят до 1 литра водой (см. 3.1).
3.11 Соляная кислота, с = 6 моль/л.
Берут 492 мл НС1 (см. 3.7) и доводят до 1 литра водой (см. 3.1).
3.12 Соляная кислота, с = 1 моль/л.
Берут 82 мл НС1 (см. 3.7) и доводят до 1 литра водой (см. 3.1).
3.13 Соляная кислота, с = 0,1 моль/л.
Берут 8,2 мл НС1 (см. 3.7) и доводят до 1 литра водой (см. 3.1).
3.14 Ортофосфорная кислота, с = 0,5 моль/л.
Берут 34 мл ортофосфорной кислоты (см. 3.6) и доводят до 1 литра водой (см. 3.1).
