«Утверждаю»
Главный государственный
санитарный врач
Республики Казахстан
Е.Е. Дурумбетов
7 июля 1997 г.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОБНАРУЖЕНИЮ, ИДЕНТИФИКАЦИИ И ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ АФЛАТОКСИНОВ В ПРОДОВОЛЬСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ С ПОМОЩЬЮ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
4.05.022.97*
Содержание
Оборудование и материалы
1. Определение афлатоксинов B1, В2 G1, G2 В пищевых продуктах
1.1. Экстракция
1.2. Очистка экстракта
1.3. Приготовление стандарстных растворов афлатоксинов B1, В2, G1, G2.
1.4. Обнаружение и количественное определение афлатоксинов
B1, В2, G1, G2 с помощью ВЭЖХ
1.5. Подтверждение наличия афлатоксинов с помощью двумерной ТСХ
2. Определение афлатоксинов B1, B2, G1, G2, в масла
2.1. Экстракция
2.2. Очистка экстракта
3. Определение афлатоксина М1 в молоке
3.1. Экстракция
3.2. Приготовление стандартного раствора афлатоксина M1
3.3. Обнаружение и количественное определение афлатоксина M1
с помощью ВЭЖХ
3.4. Подтверждение наличия афлатоксина M1 с помощью двумерной
ТСХ очистка и обнаружение афлатоксина M1
*Методические указания подготовлены Казахской Республиканской санитарно-эпидемиологической станцией на основе МУ № 4082-86, разработанных Институтом питания РАМН.
Предназначены для использования лабораториями санитарно-эпидемиологической службы, осуществляющими контроль за пищевым сырьем и продуктами питания.
Афлатоксины представляют собой токсины, продуцируемые микроскопическими грибами Aspergillus N A. parasiticus. В естественных условиях афлатоксины загрязняют арахис, кукурузу, некоторые зерновые, бобы какао и ряд других пищевых продуктов, а также корма сельскохозяйственных животных. Загрязнение афлатоксинами является серьезной проблемой для сельскохозяйственной продукции растительного происхождения из стран и регионов с субтропическим климатом. Оптимальные условия для образования афлатоксинов могут возникать при неправильном хранении сельскохозяйственной продукции, например, при самосогревании зерна.
В естественных условиях встречаются 4 афлатоксина: афлатоксины B1 и В2 (синяя флуоресценция в длинноволновом УФ-свете) и афлатоксины G1 и G2 (сине-зеленая флуоресценция). Среди них высокими токсическими свойствами и наиболее широкой распространенностью выделяется афлатоксин B1.
С молоком коров, потреблявших корма, загрязненные афлатоксинами B1 и В2 может выделяться до 3% потребленных афлатоксинов в виде соответствующих гидроксилированных метаболитов - афлатоксинов M1 и М2.
Биологическая активность афлатоксинов проявляется как в виде острого токсического эффекта, так и отдаленных последствий - канцерогенного, мутагенного и тератогеного эффектов. В настоящее время существуют убедительные эпидемиологические данные, указывающие на прямую корреляцию между частотой первичного рака печени и уровня содержания афлатоксинов в пищевых продуктах в ряде стран Юго-Восточной Азии и Африки.
