Государственный стандарт РФ
ГОСТ Р 51435-99
(ИСО 8128-1-93)
Сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки, содержащие яблочный сок.
Метод определения содержания патулина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии
Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice.
Method for determination of patulin content using high performance liquid chromatography
Применяется на территории Республики Казахстан в соответствии с приказом Председателя Комитета технического регулирования и метрологии Министерства торговли и интеграции РК от 14 декабря 2022 года № 418-НҚ
Содержание
1 Область применения
2 Сущность метода
3 Реактивы
4 Приборы и лабораторное оборудование
5 Отбор проб
6 Проведение испытаний
7 Обработка результатов
8 Точность метода
9 Протокол испытаний
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания патулина в яблочном соке, концентрированных яблочных соках и напитках, содержащих яблочный сок, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Предел обнаружения патулина настоящим методом составляет 10 
при условии, что взятый для анализа объем пробы готового к употреблению сока составляет 5 
.
2 Сущность метода
Метод основан на экстракции патулина из исследуемой пробы этилацетатом, очистке экстракта перераспределением в водный раствор карбоната натрия и количественном и качественном анализе экстракта с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием спектрофотометрического детектора в ультрафиолетовой области.
3 Реактивы
Используют реактивы аналитической чистоты и воду квалификации «для ВЭЖХ».
3.1 Растворитель: этилацетат.
3.2 Подвижная фаза - раствор ацетонитрила в воде объемной концентрации 10%.
3.3 Экстрагирующий раствор - водный раствор безводного карбоната натрия концентрации 14 
.
3.4 Ацетатный буфер, рН 4.
Смешивают 16,4 уксусной кислоты [с (
) = 0,2 
] с 3,6 раствора ацетата натрия [с (
) = 0,2 ].
3.5 Уксусная кислота, ледяная.
3.6 Стандартный раствор патулина (
).
3.6.1 Приготовление стандартного раствора
Навеску патулина массой 10,0 мг, взятую с точностью до 0,1 мг, растворяют в мерной колбе с одной отметкой вместимостью 100 в ацетатном буфере (3.4). Объем содержимого в колбе доводят до метки ацетатным буфером.
Пипеткой переносят 10,0 приготовленного раствора в другую мерную колбу с одной отметкой вместимостью 100 , объем содержимого в колбе доводят до метки ацетатным буфером. Массовая концентрация патулина в приготовленном стандартном растворе составляет около 10 
.
Измеряют оптическую плотность стандартного раствора при длине волны 276 нм на подходящем спектрофотометре с использованием кварцевых кювет рабочей длиной 10 мм.
3.6.2 Расчет концентрации стандартного раствора патулина
Концентрацию стандартного раствора патулина (3.6.1) 
, , вычисляют по формуле
,
(1)
где А - оптическая плотность стандартного раствора патулина;
