СТ РК 3506-2019
Животные
Методы лабораторной диагностики болезни Шмалленберга
(Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, NEQ)
Содержание
Введение
1. Область применения
2. Обозначения и сокращения
3. Общие положения
4. Методы диагностики
Приложение А (информационное) Пример для расчета коэффициента разбавления для испытуемого вируса
Приложение Б (информационное) Протокол испытания реакции нейтрализации
Приложение С (информационное) Результаты для контролей различных этапов ПЦР-исследования
Введение
В 2011 году у немецко-голландской границы обнаружен неизвестный orthobunyavirus, переносимый насекомыми (семейство Bunyaviridae), который впоследствии был назван вирусом Шмалленберга (ВШ). ВШ также, как и вирусы Акабане (Akabane), Айно (Aino) и Шамонда (Shamonda) относится к серогруппе Simbu.
У взрослых жвачных животных вызывает такие клинические признаки, как лихорадка, снижение молочной продуктивности или диарея. Как отмечено выше, для близкородственных вирусов, вирусная фаза коротка, вирусный геном обнаруживается только в течение 2-6 дней в крови зараженного животного. Тем не менее, РНК (RNA) вируса может быть обнаружена в течение длительного периода в лимфоретикулярной системе, особенно в брыжеечных лимфатических узлах. Первые нейтрализующие антитела обнаруживаются через одну-три недели после естественного или экспериментального заражения. Гораздо более важным признаком, помимо клинических признаков у взрослых жвачных, является развитие тяжелых пороков плода, которое в совокупности называется «синдромом артрогрипоза-гидрансфекции» (AHS), когда стельные животные, не использовавшиеся ранее в опытах, заражаются во время критической фазы беременности. Как и другие вирусы серогруппы Симбу, ВШ передается трансмиссивным путем (через насекомых-переносчиков). Вирусный геном неоднократно обнаруживался у кровососущих членистоногих рода Culicoides. Прямая горизонтальная передача ВШ крайне маловероятна, так как ороназальная инокуляция не приводила к заражению, а контактные животные оставались серонегативными.
1. Область применения
Настоящий стандарт устанавливает методы лабораторной диагностики болезни Шмалленберга.
2. Обозначения и сокращения
Вирус Шмалленберга; ВШ
Дезоксирибонуклеиновая кислота; ДНК
Иммуноферментный анализ; ИФА
Клеточная линия; BHK СТ, BHK 21
Крупный рогатый скот; КРС
Полимеразная цепная реакция; ПНР
Рибонуклеиновая кислота; РНК
3. Общие положения
3.1 Диагностика болезни Шмалленберга заключается в выделении вируса на культуре клеток и его идентификации в одной из реакций.
3.2 Диагноз на болезнь Шмалленберга устанавливают на основании результатов исследования, анализа эпизоотологических и клинических данных.
4. Методы диагностики
Методы обнаружения антител против ВШ: реакция непрямой иммунофлюоресценции, ИФА, ПНР, реакция нейтрализации.
4.1 Реакция нейтрализации
4.1.1 Принцип
